尾静脉很难打?其实是你忽略了这几点(内附独家视频)
本次文章内容丰富全面,主要分为2部分,尾静脉注射基本步骤和技术深度分析与拓展,涵盖几种小鼠品系的尾静脉注射技巧,并附有专业视频分析,非常值得大家阅读哦!
Part Ⅰ 实验基本步骤
1. 准备工作 (1ml注射器,酒精棉球,小鼠固定器)如下图:
2. 小鼠的固定 (3种方式)
尾静脉注射时需要把小鼠固定,前部有气孔保证小鼠呼吸,后部可以将尾部拉出,露出尾巴即可。最好使用小鼠固定器,不要让小鼠在固定器中有太多活动空间,防止注射时乱动。
然而我们却总是面临小鼠固定器损坏或丢失的情况,或者有的同学压根嫌弃固定器,觉得安装起来太麻烦,这里分享给大家2个替补的好方案,简单快捷。
笼盖压尾法:动物笼盖子露出尾巴,注射时最好让人帮你扶住笼子,固定住小鼠。
离心管固鼠法: 用手边50ml离心管,底部开若干小口便于小鼠呼吸,然后把盖子戳一个洞,拉出鼠尾,为了让小鼠顺利进入离心管,可用黑布包裹试管,注射时用胶带把离心管固定在实验台上。
3. 找准尾静脉,并扩张血管
相信有一个困惑很多人的问题,尾静脉到底是哪条?这么细小,能扎进去吗?
首先,想找准小鼠静脉血管,必须了解尾静脉组成。结合下图所示:
一般来讲,小鼠尾部有3条静脉,位于背侧和左右两侧,由于背部静脉较深且细,一般选择左右两侧尾静脉进行注射;另外1条动脉,位于腹侧。
第二步:扩张静脉血管(3种途径)
鉴于小鼠尾静脉细小并且不明显,所以在注射之前需要将血管扩张,便于注射。
① 可以将小鼠尾部在45~50℃左右温水浸浴2min,以扩张静脉;
② 用酒精擦拭血管,可使血管扩张,同时也可软化表皮角质;
③ 利用红外线烤灯加热鼠尾3-5min,使静脉充盈。
4. 注射(最关键最困难部分)
当我们准备好注射药物,找准尾静脉固定后,就开始进行注射了。具体步骤如下:
①左手固定鼠尾,右手持注射器,第一次注射从距尾尖2~3cm处(1/3处)进针。在这进针的原因有2个:此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易;而且一旦注射不成功,再次注射时有更多近端注射的余地;
②右手进针时针头与桌面平行,一旦进入,将针头稍稍上挑;
③待针头进入血管后见回血,立即注射,注射时可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力,代表注射成功;若针头不在静脉血管中,手感针行有阻力,注射失败;
④注射完毕后,为了避免药物流出,针头缓慢旋转抽出;
⑤注射后小鼠伤口处理,用纱布或者酒精棉球按压伤口,直到不出血为止,一般3-5min,这样有利于创口尽快恢复,以利于下次注射。
注意事项:
① 进针时不要太深,针头入血管后马上把针头略往上,平行进针;
② 注射时如果阻力较大,甚至出现渗液,则说明不在静脉内,需要拔出再次注射;
③注射时推液时不要过快,平缓注射;
④注射器吸入药液后,务必一定要将空气推出,防止因空气进入心脏,造成小鼠死亡,切记:不可注射含有空气的液体。
便于更好理解,以裸鼠和小白鼠为例,请大家花1min时间,观看下面视频:
https://v.qq.com/txp/iframe/player.html?vid=x0395gqs2tf&width=500&height=375&auto=0
Part Ⅱ 技术深度分析与拓展
1. 注射成功案例分析
结合上面动图,我们可以看到注射成功的特点:
① 进针时,针头可见少量回血,代表注射到静脉
② 注射到静脉,推液几乎没有阻力
③ 随着药液推进,能清晰看到液体在血管流动
④ 拔针时,伤口处会有少量血液和药液的混合物
如下图为注射成功后的尾巴:伤口处会有少量血液和药液的混合物
2. 注射失败案例分析
结合上面动图,我们可以看到注射失败的特点:
① 如果注射到静脉以外,强行推液,阻力较大
② 注射时,液体无法进入从而导致血管变白
③ 出针后,对于有大量血或者药液大量渗出
④ 由于失败后尾部会有淤血,尾巴颜色变暗并肿胀
如下图为注射失败的尾巴:有大量血液和药液的混合液渗出
3. 不同品系的小鼠如何对待
不同品系的小鼠尾静脉的组成几乎是一样的,只是不同品系和肤色的小鼠尾巴的识别度不一样,所以我们需要区别对待。
① 裸鼠(注射最简单)尾巴如下图:
因为裸鼠的静脉血管呈扁平状且细小,但特别容易识别,因此在各类小鼠品系中注射最简单;按上述操作即可。
② 小白鼠 (注射比较简单)尾巴如下图:
一般小白鼠的静脉血管在酒精擦拭后,比较清晰可见,注射时比较简单。
③ 小黑鼠(注射最难)尾巴如下图:
小黑鼠的血管不易辨别,所以需要红外灯等外界条件辅助下,充分刺激后使其血管尽量扩张,便于识别;另外尾巴皮肤较硬,适当控制力度。
4. 静脉注射物为:细胞系、病毒、细菌时等如何处理?
尾静脉注射除了作为一种常见的给药方式,也有很多其他应用。如全身性的白血病模型、小鼠乳腺癌肺部转移模型,均需要将肿瘤细胞利用尾静脉方式注射。例如还有模拟其他细菌、病毒等感染模型,也常需要尾静脉注射。
注射手法和药物注射基本一样,但还是需要注意一下几点!
① 相比药液,注射的细胞更加粘稠,所以一定要均匀稀释后,吸入注射器;
②确认静脉血管后,由于细胞,细菌及病毒等对小鼠身体伤害大,一定缓慢注射,过快会造成小鼠休克,严重的话会造成小鼠死亡;
③ 注射大量细胞或者病毒后,小鼠会变得虚弱,体温变凉,需放置于37℃的恒温平台上;
④ 肿瘤细胞、病毒及细菌等注射时,一定要做好防护工作,避免液体溅出,造成自身伤害。
5. 对于SD大鼠的注射
基本操作步骤和小鼠差不多,重点是在于:
① 老鼠个体大,一定要固定好保证一定不能乱动;
② 充分暴露尾静脉,可以拿温水多泡或者酒精多擦试几次。
看了咱们这篇图文并茂的文章,有没有觉得尾静脉注射并不难呢,牢记文章所说的几点实验技巧,并且心平气和地地多加练习,相信你一定可以完成。当然了,如果你的实践操作中有任何难题,可以给我们留言,我们尽力帮你解答。
模式动物系列(—)小鼠基本信息
1.6 常见小鼠实验操作技能(小鼠的抓取与固定、给药方式等)
1.7 尾静脉注射实验技巧
2. 模式动物系列(二)基因编辑鼠
2.3 sgRNA表达载体构建
3. 模式动物系列(三)疾病动物模型
4. 实践中的实验动物福利和伦理
4.1 Nature论文险被撤稿,你的动物实验合乎动物福利和伦理吗?
5. 小鼠命名规则
6. 代谢综合征动物模型
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