查看原文
其他

尾静脉很难打?其实是你忽略了这几点(内附独家视频)

2017-04-27 孟云 邦耀实验室
导读
实验动物中采用的给药方法众多,根据药物性质和实验目的不同,需要采用不同的给药方式,如上一期介绍的灌胃、腹腔、皮下注射及静脉注射给药,在这几种给药方式中尾静脉给药难度最大,却也是我们不可或缺的实验技能。今天,就和大家分享下尾静脉注射的技巧。


本次文章内容丰富全面,主要分为2部分,尾静脉注射基本步骤和技术深度分析与拓展,涵盖几种小鼠品系的尾静脉注射技巧,并附有专业视频分析,非常值得大家阅读哦!

 

Part Ⅰ   实验基本步骤

 

1. 准备工作 (1ml注射器,酒精棉球,小鼠固定器)如下图:



2. 小鼠的固定  (3种方式)


尾静脉注射时需要把小鼠固定,前部有气孔保证小鼠呼吸,后部可以将尾部拉出,露出尾巴即可。最好使用小鼠固定器,不要让小鼠在固定器中有太多活动空间,防止注射时乱动。



然而我们却总是面临小鼠固定器损坏或丢失的情况,或者有的同学压根嫌弃固定器,觉得安装起来太麻烦,这里分享给大家2个替补的好方案,简单快捷。


笼盖压尾法:动物笼盖子露出尾巴,注射时最好让人帮你扶住笼子,固定住小鼠。



离心管固鼠法: 用手边50ml离心管,底部开若干小口便于小鼠呼吸,然后把盖子戳一个洞,拉出鼠尾,为了让小鼠顺利进入离心管,可用黑布包裹试管,注射时用胶带把离心管固定在实验台上。



3. 找准尾静脉,并扩张血管


相信有一个困惑很多人的问题,尾静脉到底是哪条?这么细小,能扎进去吗?

首先,想找准小鼠静脉血管,必须了解尾静脉组成。结合下图所示:

一般来讲,小鼠尾部有3条静脉,位于背侧和左右两侧,由于背部静脉较深且细,一般选择左右两侧尾静脉进行注射;另外1条动脉,位于腹侧。



第二步:扩张静脉血管(3种途径)

鉴于小鼠尾静脉细小并且不明显,所以在注射之前需要将血管扩张,便于注射。


① 可以将小鼠尾部在45~50℃左右温水浸浴2min,以扩张静脉;


② 用酒精擦拭血管,可使血管扩张,同时也可软化表皮角质;


③ 利用红外线烤灯加热鼠尾3-5min,使静脉充盈。

 

4. 注射(最关键最困难部分)


当我们准备好注射药物,找准尾静脉固定后,就开始进行注射了。具体步骤如下:


①左手固定鼠尾,右手持注射器,第一次注射从距尾尖2~3cm处(1/3处)进针。在这进针的原因有2个:此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易;而且一旦注射不成功,再次注射时有更多近端注射的余地;


②右手进针时针头与桌面平行,一旦进入,将针头稍稍上挑;


③待针头进入血管后见回血,立即注射,注射时可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力,代表注射成功;若针头不在静脉血管中,手感针行有阻力,注射失败;


④注射完毕后,为了避免药物流出,针头缓慢旋转抽出;


⑤注射后小鼠伤口处理,用纱布或者酒精棉球按压伤口,直到不出血为止,一般3-5min,这样有利于创口尽快恢复,以利于下次注射。


注意事项:


① 进针时不要太深,针头入血管后马上把针头略往上,平行进针;


② 注射时如果阻力较大,甚至出现渗液,则说明不在静脉内,需要拔出再次注射;


③注射时推液时不要过快,平缓注射;


④注射器吸入药液后,务必一定要将空气推出,防止因空气进入心脏,造成小鼠死亡,切记:不可注射含有空气的液体。


便于更好理解,以裸鼠和小白鼠为例,请大家花1min时间,观看下面视频:


https://v.qq.com/txp/iframe/player.html?vid=x0395gqs2tf&width=500&height=375&auto=0


Part Ⅱ   技术深度分析与拓展

 

1. 注射成功案例分析



结合上面动图,我们可以看到注射成功的特点:


① 进针时,针头可见少量回血,代表注射到静脉


② 注射到静脉,推液几乎没有阻力


③ 随着药液推进,能清晰看到液体在血管流动


④ 拔针时,伤口处会有少量血液和药液的混合物

 

如下图为注射成功后的尾巴:伤口处会有少量血液和药液的混合物



2. 注射失败案例分析



结合上面动图,我们可以看到注射失败的特点:


① 如果注射到静脉以外,强行推液,阻力较大


② 注射时,液体无法进入从而导致血管变白


③ 出针后,对于有大量血或者药液大量渗出


④ 由于失败后尾部会有淤血,尾巴颜色变暗并肿胀

 

如下图为注射失败的尾巴:有大量血液和药液的混合液渗出



3. 不同品系的小鼠如何对待


不同品系的小鼠尾静脉的组成几乎是一样的,只是不同品系和肤色的小鼠尾巴的识别度不一样,所以我们需要区别对待。


① 裸鼠(注射最简单)尾巴如下图:

因为裸鼠的静脉血管呈扁平状且细小,但特别容易识别,因此在各类小鼠品系中注射最简单;按上述操作即可。



② 小白鼠 (注射比较简单)尾巴如下图:

一般小白鼠的静脉血管在酒精擦拭后,比较清晰可见,注射时比较简单。



③ 小黑鼠(注射最难)尾巴如下图:

小黑鼠的血管不易辨别,所以需要红外灯等外界条件辅助下,充分刺激后使其血管尽量扩张,便于识别;另外尾巴皮肤较硬,适当控制力度。



4. 静脉注射物为:细胞系、病毒、细菌时等如何处理?


尾静脉注射除了作为一种常见的给药方式,也有很多其他应用。如全身性的白血病模型、小鼠乳腺癌肺部转移模型,均需要将肿瘤细胞利用尾静脉方式注射。例如还有模拟其他细菌、病毒等感染模型,也常需要尾静脉注射。


注射手法和药物注射基本一样,但还是需要注意一下几点!


① 相比药液,注射的细胞更加粘稠,所以一定要均匀稀释后,吸入注射器;


②确认静脉血管后,由于细胞,细菌及病毒等对小鼠身体伤害大,一定缓慢注射,过快会造成小鼠休克,严重的话会造成小鼠死亡;


③ 注射大量细胞或者病毒后,小鼠会变得虚弱,体温变凉,需放置于37℃的恒温平台上;


④ 肿瘤细胞、病毒及细菌等注射时,一定要做好防护工作,避免液体溅出,造成自身伤害。

 

5. 对于SD大鼠的注射


基本操作步骤和小鼠差不多,重点是在于:


① 老鼠个体大,一定要固定好保证一定不能乱动;


② 充分暴露尾静脉,可以拿温水多泡或者酒精多擦试几次。


看了咱们这篇图文并茂的文章,有没有觉得尾静脉注射并不难呢,牢记文章所说的几点实验技巧,并且心平气和地地多加练习,相信你一定可以完成。当然了,如果你的实践操作中有任何难题,可以给我们留言,我们尽力帮你解答。


精彩内容列表(持续更新)

模式动物系列(—)小鼠基本信息

1.1 常见大小鼠品系

1.2 如何进行小鼠科学地饲养

1.3 小鼠的一生及繁育过程

1.4 ICR小鼠绝美写真

1.5 小鼠隔离与净化

1.6 常见小鼠实验操作技能(小鼠的抓取与固定、给药方式等)

1.7 尾静脉注射实验技巧


2. 模式动物系列(二)基因编辑鼠

2.1  基因编辑鼠的构建

2.2  gRNA设计和筛选

2.3  sgRNA表达载体构建

2.4  显微注射操作步骤及要点

2.5  小鼠培育及繁殖过程

2.6  小鼠基因型鉴定

2.7  小鼠保种方式(精子、胚胎冻存)

2.8  小鼠体外受精介绍


3. 模式动物系列(三)疾病动物模型

3.1 疾病动物模型基本介绍

3.2 免疫缺陷动物

3.3 人源化动物

3.4 肿瘤动物模型介绍

3.5 肿瘤模型之生长、转移及复发模型

3.6 免疫疗法相关肿瘤模型介绍


4.  实践中的实验动物福利和伦理

4.1 Nature论文险被撤稿,你的动物实验合乎动物福利和伦理吗?


5. 小鼠命名规则

5.1 常见小鼠命名规则

5.2 基因工程鼠命名规则(上)——定点突变小鼠

5.3 基因工程鼠命名规则(下)——转基因小鼠


6. 代谢综合征动物模型

6.1 糖尿病动物模型综述

6.2 1型糖尿病动物模型介绍

6.3 2型糖尿病动物模型介绍


7.1 肝损伤动物模型介绍


长按下方二维码,可关注我们

(微信ID)bioraylab

邦耀实验室关注国内外生命科学最新动态,发布原创评论,分享实验技巧。

欢迎个人转发朋友圈,公众号、报刊等转发请联系下面邮箱授权。

brl@bioraylab.com

您可能也对以下帖子感兴趣

文章有问题?点此查看未经处理的缓存